畜禽舍臭氧消毒對動物血液理化指標的影響

      臭氧是一種廣譜、高效的消毒劑和殺菌劑，在醫療衛生及其他行業消毒中已得到廣泛應用。目前我國畜禽養殖場防疫消毒存在諸多問題，臭氧作為綠色消毒劑應用于畜禽防疫消毒，殺毒滅菌能力強，既經濟又方便，還可保證食品安全，值得在養殖業中大力推廣。在養殖業中常采取帶動物消毒的方法，為評價其在消毒使用中對畜禽體的安全性本試驗觀察了畜禽舍臭氧消毒對小鼠、兔、雞的血液生理指標和血清生化指標的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 
      健康新西蘭兔40只，雌雄不限，體重1～2kg，由北京農業職業學院實驗動物場提供；21日齡肉雞公雞30只，由北京農業職業學院實驗動物場提供；昆明系小鼠30只，由天壇生物醫藥公司提供。
1.2 儀器 
      全自動血細胞計數儀Medicon24000，德國西門子公司產品，BSAIC自動血液生化分析儀，法國西克曼公司產品；臭氧發生器，型號為BGY-Q4，臭氧產量1.5g～2g/h；臭氧濃度分析儀，型號為ZX-01，北京超能自控實驗技術研究所產品。
1.3 試驗設計 
      將40只新西蘭兔分成4組，即對照組、臭氧處理1h組、臭氧處理2h組、臭氧處理3h組，每組設立獨立兔舍容積為40.5m3；30只實驗小鼠和30只實驗肉雞分成3組，即對照組、臭氧處理1h組、臭氧處理2h組，每組設立獨立舍容積為23.3m3。對照組常規飼養，臭氧處理組分別于臭氧發生器開機處理1h、2h采血測定各項指標。
1.4 血樣采集 
      實驗小鼠眼眶采血2mL，兔耳靜脈采血2mL，雞翅下靜脈采血2mL。用微量血球儀取20L血液在生理鹽水作血常規指標測定；1mL血液離心分離血清后作生化指標測定。
1.5 血液指標測定
1.5.1血常規指標 
      紅細胞計數 (RBC)、白細胞計數(WBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、血球壓(HcT)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞體積分布寬度(RDW)、血小板分布寬度(PDW)。
1.5.2血清生化指標 
      總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、磷(P)、鈣(Ca)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、總膽紅素(T-BIL)、直接膽紅素(D-BIL)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉肽酶(GGT)、尿酸(UA)。
1.6 統計學處理 
      各組數據以±s表示，組間差異顯著性判定采用7檢驗。

2 結果

2.1 臭氧濃度檢測 
      兔舍：舍內溫度25℃，相對濕度60，臭氧發生器每舍放置1臺，開機后舍內臭氧濃度1h為2.6mg/m3，2h為3.9mg/m3，3h為4.6mg/m3。鼠舍和肉雞舍：舍內溫度25℃，相對濕度60，臭氧發生器每舍放置1臺，開機后舍內臭氧濃度1h為2.8mg/m3，2h為4.3mg/m3。停機后30min檢測室內臭氧濃度均低于0.1mg/m3。
2.2 兔舍臭氧消毒對兔血液生理指標和血清生化指標的影響 
      臭氧發生器開機處理1h、2h、3h后，兔的RBC、WBC、HGB、HCT、MCV，MCH、MCHC和RDW等8項血液生理指標與對照組比較差異均不顯著(P>0.05)，TP、AIB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14項血清生化指標與對照組比較差異均不顯著(P>0.05)。
2.3 鼠舍臭氧消毒對小鼠血清生化指標的影響 
      臭氧發生器開機處理1h、2h后，小鼠TP、ALB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14項血清生化指標與對照組比較差異均不顯著(P>0.05)。
2.4 肉雞舍臭氧消毒對雞血清生化指標的影響 
      臭氧發生器開機處理1h、2h后，雞TP、ALB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14項血清生化指標與對照組比較差異均不顯著(P>0.05)。

3 討論 

      目前，畜禽養殖場大多采用化學藥劑或紫外線來消毒，但這些方法都存在不同程度的副作用。臭氧消毒滅菌具有廣譜高效、無殘害、無消毒死角等優勢，而且在無人狀況下能自動程控空氣消毒，使用非常方便。目前在養殖業方面臭氧主要用于空舍消毒，在帶動物舍消毒方面應用研究很少，僅有用臭氧對實驗動物飼養室進行消毒的研究報道。
      為評價臭氧在消毒使用中對畜禽體的安全性，本試驗觀察了畜禽舍臭氧消毒對小鼠、兔、雞的血液生理指標和血清生化指標的影響。結果可見，兔舍臭氧處理1h、2h和3h及小鼠、雞舍臭氧處理1h和2h后，兔、雞，小鼠的RBC、WBC、HGB等8項血常規指標和TP、ALB、TG等14項血清生化指標與對照組比較均無顯著性差異(P>0.05)。結果表明，畜禽舍臭氧消毒2h(臭氧濃度范圍為2.6mg/m3～4.6mg/m3)對小鼠、雞、兔的血液生理生化指標均無明顯影響，且關機后30min，臭氧的濃度可降至0.1mg/m3下，達到《消毒技術規范》關于大氣中臭氧允許濃度。結果顯示臭氧對受試動物血液學以及肝、腎功能、脂肪代謝、蛋白代謝均無不良影響，初步提示利用臭氧發生器進行畜禽養殖場帶動物舍消毒是安全的、無明顯毒性作用，為畜禽養殖場及實驗動物環境消毒方面推廣應用臭氧消毒提供了試驗依據。已有研究表明，臭氧對室內空氣中細菌有較強的殺滅效果]。臭氧消毒空氣濃度為1～2mg/m3，持續30min。對各種細菌的殺滅率可達99%以上，同時可降低空氣中的二氧化硫、氮氧化物、揮發酚，對甲醛的降低率為41%，以0.25～0.38mg/L濃度的臭氧氣體可完全滅活空氣中流感病毒和皰疹病毒。本試驗條件下臭氧對畜禽舍空氣中氨和細菌的凈化效果與前報道基本一致。Bignami等口叩將懷孕7d的CD21小鼠分別在0.8、1.6和2.4mg/m3的環境下飼養至第17天，觀察臭氧對CD21小鼠繁殖性能的影響。結果發現，試驗組孕鼠出生的小鼠在體型大小、性別比例、死胎數、新生小鼠死亡率等方面與對照組沒有差別。關于本試驗條件下臭氧消毒對動物的遺傳性能、生長發育以及各系統功能等方面的影響，還需進一步深入研究，為臭氧消毒積累相關的生物安全資料。

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